实验室和细胞培养污染是在生物医疗研究中面临的严重风险。污染不仅影响细胞培养的有效性,还可能导致实验结果的不准确,浪费宝贵的资源。在生物制造领域,这一问题尤为重要,因为它是导致产品批次不合格的主要因素之一。不幸的是,污染事件相当普遍,其原因多种多样,包括人为失误、交叉污染、不当实验方法及受污染的原材料等。此外,污染有时难以早期检测,这意味着在发现问题之前,污染可能已经扩散至大规模培养物。
为保护珍贵的细胞培养物,制定有效的预防措施显得尤为重要。今天,我们将讨论有关污染控制及降低风险的方法。首先,支原体污染是细胞培养中必须重点关注的因素,因为它会显著影响细胞的行为、形态和功能。此外,许多学术期刊在论文评审中会要求提供支原体检测的结果。幸运的是,可通过简单的DNA荧光染色法和基于PCR的支原体检测方法来进行检测。您可以在实验室内部轻松完成这些检测,或将样本送至外部实验室进行验证。
在维护实验室时,通风橱和培养箱需要定期维护以减少污染的风险。这些设备通常由多个团队共享,因此应每月使用消毒剂和70%乙醇对其表面进行清洁。培养架应高压蒸汽灭菌,水盘则需定期更换并清洁。建议每天使用70%乙醇对通风橱内的空间进行清洁,每月则用10%漂白剂进行彻底清洁。
在供应链方面,细胞系和原材料的供应商在放行产品前应进行全面检测,并提供相应的检测结果文件以证明其无菌性。无菌保证水平(SAL)的标准可能因生产商或产品的不同而有所差异。对于极为敏感的细胞和产品,建议在使用前对培养基进行过滤灭菌。
抗生素的使用在防止细胞培养中的细菌污染方面非常普遍,但已有研究指出,抗生素可能诱导细胞基因表达的变化。因此,在使用抗生素时必须进行仔细评估,以避免与其它药物发生未知的相互作用。利用转录组测序(RNA-Seq)和染色质免疫沉淀测序(ChIP-Seq)等技术可以有效评估抗生素对基因表达的影响。
在细胞培养的过程中,确保最佳的实验条件是至关重要的。如果发现污染,应立即对培养箱、水浴箱和通风橱等进行彻底清理,确保所有可能被污染的培养基和试剂都得到更换。同时,要有意识地进行自我检查,确保每个实验人员都遵循正确的操作流程,以防止简单的失误导致严重的后果。
交叉污染也常常发生,它会导致不同细胞系的意外混合。定期对细胞形态和遗传特征进行检查是避免此类问题的有效措施。实施严格的操作规则,例如每次只操作一种细胞系,并在使用新的细胞系之前后彻底清洗实验室设备,以降低交叉污染的风险。
总之,细胞培养的污染控制是一个系统性工程,涉及实验室的各个方面。采取科学合理的操作和检测方法,能够有效降低污染的发生概率,确保研究的准确性和有效性。我们提倡在实验过程中始终保持高度的警觉性,以确保实验环境的清洁。选择俄罗斯专享会284等专业品牌的产品,可进一步提升实验室操作的安全性和有效性。