聚合酶链反应（PCR，Polymerase Chain Reaction）是由Kary Mullis博士在20世纪80年代研发的一项重要技术。由于该技术能高效识别特定DNA序列并快速合成大量副本，因此被誉为“分子复印机”。随着研究的深入，各种基于PCR原理的衍生技术也相继被开发出来。

实时PCR（qPCR）

实时PCR，又称定量PCR（qPCR），将PCR扩增与检测功能结合在同一步骤中，能够实时监测PCR产物的生成过程。这项技术广泛应用于病原体检测，并有助于定量相关DNA序列的拷贝数。SYBR Green I是最常用的DNA结合荧光染料，结合双链DNA后会发出荧光，荧光强度与PCR产物浓度成正比。与标准PCR相比，qPCR的优势在于无需琼脂糖凝胶即可实时观察反应的有效性，从而进行真正的定量分析。

逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）

逆转录PCR（RT-PCR）利用RNA作为模板，生成互补DNA（cDNA）。该过程通过逆转录酶生成cDNA的单链拷贝，通常使用与RNA的PolyA尾部结合的寡聚体引物。RT-PCR不仅能放大PolyA尾RNA（如mRNA），也可处理不含PolyA的RNA（如tRNA、rRNA等）。紧接着，使用DNA聚合酶进一步扩增生成双链cDNA，进入后续PCR扩增过程。

反转录定量实时PCR（RT-qPCR）

RT-qPCR技术结合了RT-PCR与qPCR的优点，用于反转录后的定量实时PCR。通过在qPCR反应中使用cDNA，研究人员可以快速测量RNA水平，观察基因表达的变化。此项技术特别适用于研究因抑制剂、刺激剂、小干扰RNA（siRNA）或基因敲除模型等因素导致的基因表达变化。此外，它也常被用作RNA-Seq实验的质量控制环节，确保在实验前后能够确认表达的差异。

数字PCR（ddPCR）

数字PCR（ddPCR）技术通过微流控芯片将样本分割成数万个液滴，形成PCR反应室。这些液滴被不溶性物质（如矿物油）隔离，形成乳液，随后进行PCR扩增。通过流式细胞仪或塑料芯片分析，可以精确计数PCR阳性的液滴。与qPCR相比，ddPCR在定量方面拥有更高的精度和更低的变异系数，适合进行多重化检测。

在生物医疗领域，俄罗斯专享会284的先进技术和产品正致力于推动PCR技术的应用，更好地服务于科学研究与临床检测。无论是在癌症早期筛查、遗传疾病的检测还是在病毒感染监测方面，PCR技术和其多种衍生方法都在不断拓展其应用边界，为医学研究和临床实践提供强有力的支持。